技術(shù)文章
Technical articles分離細(xì)胞的離心力常在(400~1000)g,轉(zhuǎn)速不高。因此,在降速過程中不能用制動(dòng)器,若使用制動(dòng),Coriolis力會(huì)產(chǎn)生渦旋效應(yīng),使離心過程中分離很好的區(qū)帶再次混合,或者使區(qū)帶變形、擴(kuò)寬。當(dāng)使用黏度低的介質(zhì)如Percoll、Iodixanol等,降速不穩(wěn)會(huì)造成嚴(yán)重影響。有些離心機(jī)有慢降速程序,使用它可有效提高梯度分辨率。很多細(xì)胞分離所要求的離心機(jī)轉(zhuǎn)速只有每分鐘幾十到幾百轉(zhuǎn),大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)在這一轉(zhuǎn)速范圍內(nèi)轉(zhuǎn)速不穩(wěn)定,有些離心機(jī)根本無法設(shè)定,可以采用增加梯度介質(zhì)密度的方法提...
毛細(xì)管血液離心機(jī)可用于測(cè)定血液血細(xì)胞比積值,微量血液和微量溶液的分離。對(duì)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)中臨床血液學(xué)與檢驗(yàn)具有重要作用。新款機(jī)型較之老款機(jī)型結(jié)構(gòu)大體一樣,除了及個(gè)別的外觀和控制面板具有重大改善,新款機(jī)型的外殼材質(zhì)不再采用笨重的資源的鋼板,而是采用高強(qiáng)度,耐沖擊,耐熱,耐化學(xué)腐蝕的工程塑料(engineering-plastics),外觀結(jié)構(gòu)弧度更加圓滑,顏色舒適,將實(shí)驗(yàn)室儀器的風(fēng)格表現(xiàn)的,觸摸面板采用分層結(jié)構(gòu),與老型號(hào)的機(jī)器相比更突顯出機(jī)器控制界面友好性和易操作性。新款機(jī)型的正式推出...
實(shí)驗(yàn)室一般采用差速離心或密度梯度離心的方法得到分離細(xì)胞器。1.細(xì)胞膜的分離細(xì)胞膜又稱質(zhì)膜,分離細(xì)胞膜有助于研究生物膜的結(jié)構(gòu)與功能。一般說,紅細(xì)胞膜與線粒體膜的制備用差速離心法即可,其他細(xì)胞膜的分離可根據(jù)膜組分的密度大小不同,采用梯度離心后,分布于區(qū)域,可分離得到純制品。2.線粒體的分離線粒體普遍存在于真核細(xì)胞中,它是細(xì)胞呼吸的主要場(chǎng)所,細(xì)胞活動(dòng)所需能量主要依靠在線粒體內(nèi)進(jìn)行氧化所產(chǎn)生的能,線粒體的分離主要靠差速分離。3.線粒體膜分離線粒體膜分離方法主要是密度梯度離心。4.聚核...
根據(jù)顆粒在作勻速圓周運(yùn)動(dòng)時(shí)受到一個(gè)外向離心力的原理,發(fā)展了一種離心分離技術(shù)。這項(xiàng)技術(shù)應(yīng)用很廣,諸如分離出化學(xué)反應(yīng)后的沉淀物、天然的生物大分子、無機(jī)物、有機(jī)物,或者生物化學(xué)以及其他的生物學(xué)領(lǐng)域中常用來收集細(xì)胞、細(xì)胞器及大分子物質(zhì)。在國內(nèi)的蛋白質(zhì)制藥行業(yè),離心的根本目的是濃縮和分離,將固體從液體中分離,或者將不同密度的懸浮物、液相通過沉降速度的差異分離開來。離心技術(shù)首先用于粗提收集菌體,其次是用于上柱前澄清,在藥物分析中可以用來檢定分子質(zhì)量、純度及篩選新的藥物。
豬腎中微粒體膜組分粗品的分離儀器與試劑1.超速離心機(jī)(冷凍離心機(jī))和轉(zhuǎn)頭2.勻漿緩沖液。50mmol/LHepes/NaOH(pH7.4),0.33mol/L蔗糖。3.重懸緩沖液。10mmol/LHepes/NaOH(pH7.4)。方法1.使用韋林?jǐn)嚢杵鳎ㄒ?℃預(yù)冷)在10倍體積(1L)的勻漿緩沖液(要求4℃預(yù)冷),中破碎100g豬腎皮質(zhì)。2.將勻漿物在離心機(jī)中于8000×g離心15min;3.小心地轉(zhuǎn)移出上清液,并將其在26000×g離心2min;4.用重懸緩沖液(要求4...
分析超速離心機(jī)能用于測(cè)定溶液中大分子的沉降速度,這就是通常所說的沉降速度法;或者在較低的離心轉(zhuǎn)速下離心一定時(shí)間后,是其在離心分析池中各個(gè)平面位置的樣品溶質(zhì)濃度不再有變化,建立起平衡狀態(tài),從而測(cè)定其大分子的分布,即所謂的沉降平衡法。其他一些沉降速度法和近似沉降平衡法等都是在次原理上派生出的。在速度沉降試驗(yàn)中,離心機(jī)轉(zhuǎn)速可用到60000r/min,甚至更高,依試樣分子量大小而定。
中國古代,人們用繩索的一端系住陶罐,手握繩索的另一端,旋轉(zhuǎn)甩動(dòng)陶罐,產(chǎn)生離心力擠壓出陶罐中漿果的汁液,這就是離心分離原理的早期應(yīng)用。工業(yè)離心機(jī)誕生于歐洲,比如19世紀(jì)中葉,先后出現(xiàn)紡織品脫水用的三足式離心機(jī),和制糖廠分離結(jié)晶砂糖用的上懸式離心機(jī)。這些zui早的離心機(jī)都是間歇操作和人工排渣的。由于卸渣機(jī)構(gòu)的改進(jìn),20世紀(jì)30年代出現(xiàn)了連續(xù)操作的離心機(jī),間歇操作離心機(jī)也因?qū)崿F(xiàn)了自動(dòng)控制而得到發(fā)展。1879年,瑞典的拉瓦爾發(fā)明*臺(tái)從牛奶中分離奶油的分離機(jī),它的轉(zhuǎn)鼓僅是一個(gè)空心的圓筒...
用離心機(jī)來分離細(xì)胞的梯度介質(zhì)和密度梯度的制備受很多條件的制約,理想的梯度應(yīng)滿足以下條件:對(duì)細(xì)胞無毒;能形成具有足夠密度的等滲介質(zhì);不滲入細(xì)胞;分級(jí)分離后容易從細(xì)胞中除去;形成梯度的粘度低。用來分類細(xì)胞的密度梯度形狀各種各樣,可以是連續(xù)梯度,也可以是不連續(xù)梯度,可以使用特殊梯度,如等動(dòng)力梯度、等體積梯度、指數(shù)梯度和對(duì)數(shù)梯度。
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